Kinyoun plet - Kinyoun stain

Den Kinyoun Fremgangsmåde eller Kinyoun plet (kold metode), udviklet af Joseph J. Kinyoun , er en procedure, der anvendes til farvning syrefaste arter af bakterieslægter Mycobacterium og Nocardia og apicomplexa slægten Cryptosporidium . Det er en variation af en metode udviklet af Robert Koch i 1882. Visse bakteriearter har et voksagtigt lipid kaldet mycolsyre i deres cellevægge, som gør det muligt at bejdse dem med Acid-Fast bedre end en Gram-Stain. Mycobakteriens unikke evne til at modstå affarvning med syrealkohol er derfor, at de betegnes syrefast. Det indebærer påføring af en primær plet ( basisfuchsin ), en affarvningsmiddel ( syrealkohol ) og en modfarvning ( methylenblåt ). I modsætning til Ziehl – ​​Neelsen -pletten (ZN -pletten) kræver Kinyoun -farvningsmetoden ikke opvarmning. I Ziehl – ​​Neelsen -pletten virker varmen som en fysisk bejdsende, mens phenol (carbol af carbol fuschin) fungerer som den kemiske bejdsemiddel. Da Kinyoun -pletten er en kold metode (ingen varme påføres), øges koncentrationen af ​​carbol fuschin, der bruges.

Resumé af syrefast plet (Kinyoun-plet)
Anvendelse af Reagens Cellefarve
Syre hurtigt Ikke-syrefast
Primær farvestof Carbol fuchsin Rød Rød
Affarvning Sur alkohol Rød Farveløs
Tæller Plet Methylenblåt Rød Blå

Farvningsprocedure

Kinyoun -plet på organismen Mycobacterium smegmatis

Lav en syrefast plet

Materialer

  • Glid med organismeudtværing
  • Carbol Fuchsin
  • Syre-alkohol
  • Methylenblåt
  • skævt papir
  • Mikroskop

Instruktioner

  1. Smør på et dias med organismer
    • Rengør dias, voks -etiketglas, spred organismen, lufttør i 10 minutter, varmefiks
  2. Dyp objektglasset ned i Carbol Fuchsin i 20 minutter.
  3. Skyl dias
  4. Dyp objektglasset ned i Acid-alkohol i 3-5 sekunder.
  5. Skyl dias
  6. Dyp objektglasset ned i methylenblåt i 30 sekunder.
  7. Skyl dias
  8. Tør objektglasset tørt med papir.
  9. Observer under mikroskop.

Modifikation

Kinyoun -metoden kan ændres som en svag syrefast plet, der bruger 5% svovlsyre i stedet for saltsyre. Den svage syre hurtige plet udover farvning af mycobakterier vil plette organismer, der ikke er i stand til at opretholde carbol fuchsin efter affarvning med HCl.

Se også

Referencer

Stub ikon

Denne mikrobiologirelaterede artikel er en stubbe . Du kan hjælpe Wikipedia ved at udvide den .