Mikrosom - Microsome

I cellebiologi er mikrosomer heterogene vesikellignende artefakter (~ 20-200 nm diameter), der re-formes fra stykker af det endoplasmatiske retikulum (ER), når eukaryote celler brydes op i laboratoriet ; mikrosomer findes ikke i raske, levende celler.

Mikrosomer kan koncentreres og adskilles fra andet celleaffald ved differentiel centrifugering . Ubrudte celler, kerner og mitokondrier sedimenterer ved 10.000 g, hvorimod opløselige enzymer og fragmenteret ER, som indeholder cytochrom P450 (CYP), forbliver i opløsning (g er Jordens tyngdekraftacceleration). Ved 100.000 g, opnået ved hurtigere centrifugerotation, sedimenterer ER ud af opløsningen som en pellet, men de opløselige enzymer forbliver i supernatanten . På denne måde koncentreres og isoleres cytochrom P450 i mikrosomer. Mikrosomer har en rødbrun farve på grund af tilstedeværelsen af hæm . På grund af behovet for et flerdelt proteinsystem er mikrosomer nødvendige for at analysere CYP'ers metaboliske aktivitet. Disse CYP'er er meget rigelige i lever af rotter, mus og mennesker, men findes også i alle andre organer og organismer.

For at få mikrosomer indeholdende et specifikt CYP eller for store mængder aktivt enzym, fremstilles mikrosomer fra Sf9 insektceller eller i gær via heterolog ekspression . Alternativt kan ekspression i Escherichia coli af hele eller afkortede proteiner også udføres. Derfor er mikrosomer et værdifuldt redskab til at undersøge metabolismen af ​​forbindelser (enzymhæmning, clearance og metabolitidentifikation ) og til undersøgelse af lægemiddel -lægemiddelinteraktioner ved in vitro -research. Forskere vælger ofte mikrosome -partier baseret på enzymaktivitetsniveauet for specifikke CYP'er. Nogle partier er tilgængelige for at studere specifikke populationer (eksempel: lungemikrosomer fra rygere eller ikke-rygere) eller opdelt i klassifikationer for at opfylde mål CYP-aktivitetsniveauer for inhiberings- og metabolismeundersøgelser.

Forskere bruger mikrosomer til at efterligne aktiviteten af ​​det endoplasmatiske net i et reagensglas og udføre eksperimenter, der kræver proteinsyntese på en membran; de giver forskere en måde at finde ud af, hvordan proteiner dannes på ER på en celle ved at rekonstituere processen i et reagensglas.

Se også

Referencer

eksterne links